科普文:是什么影響了顯微鏡的成像效果?
成像顯示效果主要跟哪些參數(shù)有關(guān),有沒有口碑比較好的中端顯微鏡?
影響顯微鏡成像的主要核心因素有光路設(shè)計(jì)、鏡頭質(zhì)量、光源的單色性等都會(huì)影響觀察的清晰度。
1、影響光學(xué)顯微鏡分辨率的關(guān)鍵因素是什么?
影響光學(xué)顯微鏡分辨率的關(guān)鍵因素:
1.2、色差
色差是透鏡成像的一個(gè)嚴(yán)重缺陷,發(fā)生在多色光為光源的情況下,單色光不產(chǎn)生色差。白光由紅 橙 黃 綠 青 藍(lán) 紫 七種組成,各種光的波長不同 ,所以在通過透鏡時(shí)的折射率也不同,這樣物方一個(gè)點(diǎn),在像方則可能形成一個(gè)色斑。
色差一般有位置色差,放大率色差。位置色差使像在任何位置觀察,都帶有色斑或暈環(huán),使像模糊不清。而放大率色差使像帶有彩色邊緣。
1.2、球差
球差是軸上點(diǎn)的單色相差,是由于透鏡的球形表面造成的。球差造成的結(jié)果是,一個(gè)點(diǎn)成像后,不在是個(gè)亮點(diǎn),而是一個(gè)中間亮、邊緣逐漸模糊的亮斑。從而影響成像質(zhì)量。
球差的矯正常利用透鏡組合來消除,由于凸、凹透鏡的球差是相反的,可選配不同材料的凸凹透鏡膠合起來給予消除。舊型號(hào)顯微鏡,物鏡的球差沒有完全矯正,應(yīng)與相應(yīng)的補(bǔ)償目鏡配合,才能達(dá)到糾正效果。一般新型顯微鏡的球差完全由物鏡消除。
1.3、慧差
慧差屬軸外點(diǎn)的單色相差。軸外物點(diǎn)以大孔徑光束成像時(shí),發(fā)出的光束通過透鏡后,不再相交一點(diǎn),則一光點(diǎn)的像便會(huì)得到一逗點(diǎn)狀,型如慧星,故稱“慧差”。
1.4、像散
像散也是影響清晰度的軸外點(diǎn)單色相差。當(dāng)視場(chǎng)很大時(shí),邊緣上的物點(diǎn)離光軸遠(yuǎn),光束傾斜大,經(jīng)透鏡后則引起像散。像散使原來的物點(diǎn)在成像后變成兩個(gè)分離并且相互垂直的短線,在理想像平面上綜合后,形成一個(gè)橢圓形的斑點(diǎn)。像散是通過復(fù)雜的透鏡組合來消除。
1.5、 場(chǎng)曲
場(chǎng)曲又稱“像場(chǎng)彎曲”。當(dāng)透鏡存在場(chǎng)曲時(shí),整個(gè)光束的交點(diǎn)不與理想像點(diǎn)重合,雖然在每個(gè)特定點(diǎn)都能得到清晰的像點(diǎn),但整個(gè)像平面則是一個(gè)曲面。這樣在鏡檢時(shí)不能同時(shí)看清整個(gè)相面,給觀察和照相造成困難。因此研究用顯微鏡的物鏡一般都是平場(chǎng)物鏡,這種物鏡已經(jīng)矯正了場(chǎng)曲。
1.6、 畸變
前面所說各種相差除場(chǎng)曲外,都影響像的清晰度?;兪橇硪环N性質(zhì)的相差,光束的同心性不受到破壞。因此,不影響像的清晰度,但使像與原物體比,在形狀上造成失真。
- 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以外時(shí),則在像方二倍焦距以內(nèi)、焦點(diǎn)以外形成縮小的倒立實(shí)像;
- 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距上時(shí),則在像方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實(shí)像;
- 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以內(nèi),焦點(diǎn)以外時(shí),則在像方二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)像;
- 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)上時(shí),則像方不能成像;
- 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)以內(nèi)時(shí),則像方也無像的形成,而在透鏡物方的同側(cè)比物體遠(yuǎn)的位置形成放大的直立虛像。
2、顯微鏡鏡頭參數(shù)及對(duì)顯微成像質(zhì)量好壞影響
光學(xué)顯微鏡鏡頭分不同類型,但即使對(duì)于同一類型的鏡頭,其成像質(zhì)量也有著很大的差異,這主要是由于材質(zhì)、加工精度和鏡片結(jié)構(gòu)的不同等因素造成的,同時(shí)也導(dǎo)致不同檔次的鏡頭價(jià)格從幾百元到幾萬元的巨大差異。比較**的如四片三組式天塞鏡頭、六片四組式雙高斯鏡頭。對(duì)于鏡頭設(shè)計(jì)及生產(chǎn)廠家,一般用光學(xué)傳遞函數(shù)OTF(Optical Transfer Function)來綜合評(píng)價(jià)鏡頭成像質(zhì)量,光學(xué)系統(tǒng)傳遞的是亮度沿空間分布的信息,光學(xué)系統(tǒng)在傳遞被攝景物信息時(shí),被傳遞之各空間頻率的正弦波信號(hào),其調(diào)制度和位相在成實(shí)際像時(shí)的變化,均為空間頻率的函數(shù),此函數(shù)稱為光學(xué)傳遞函數(shù)。OTF一般由調(diào)制傳遞函數(shù)MTF(Modulation Transfer Function)與位相傳遞函數(shù)PTF(Phase Transfer Function )兩部分組成。像差是影響圖像質(zhì)量的重要方面,常見的像差有如下六種:
2.1、球差:
由主軸上某一物點(diǎn)向光學(xué)系統(tǒng)發(fā)出的單色圓錐形光束,經(jīng)該光學(xué)系列折射后,若原光束不同孔徑角的各光線,不能交于主軸上的同一位置,以至在主軸上的理想像平面處,形成一彌散光斑(俗稱模糊圈),則此光學(xué)系統(tǒng)的成像誤差稱為球差。
2.2、慧差:
由位于主軸外的某一軸外物點(diǎn),向光學(xué)系統(tǒng)發(fā)出的單色圓錐形光束,經(jīng)該光學(xué)系列折射后,若在理想像平面處不能結(jié)成清晰點(diǎn),而是結(jié)成拖著明亮尾巴的慧星形光斑,則此光學(xué)系統(tǒng)的成像誤差稱為慧差。
2.3、像散:
由位于主軸外的某一軸外物點(diǎn),向光學(xué)系統(tǒng)發(fā)出的斜射單色圓錐形光束,經(jīng)該光學(xué)系列折射后,不能結(jié)成一個(gè)清晰像點(diǎn),而只能結(jié)成一彌散光斑,則此光學(xué)系統(tǒng)的成像誤差稱為像散。
2.4、場(chǎng)曲:
垂直于主軸的平面物體經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)所結(jié)成的清晰影像,若不在一垂直于主軸的像平面內(nèi),而在一以主軸為對(duì)稱的彎曲表面上,即*佳像面為一曲面,則此光學(xué)系統(tǒng)的成像誤差稱為場(chǎng)曲。當(dāng)調(diào)焦至畫面中央處的影像清晰時(shí),畫面四周的影像模糊;而當(dāng)調(diào)焦至畫面四周處的影像清晰時(shí),畫面中央處的影像又開始模糊。
2.5、色差:
由白色物體向光學(xué)系統(tǒng)發(fā)出一束白光,經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)折射后,各色光不能會(huì)聚于一點(diǎn)上,而形成一彩色像斑,稱為色差。色差產(chǎn)生的原因是同一光學(xué)玻璃對(duì)不同波長的光線的折射率不同,短波光折射率大,長波光折射率小。
2.6、畸變:
被攝物平面內(nèi)的主軸外直線,經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)成像后變?yōu)榍€,則此光學(xué)系統(tǒng)的成像誤差稱為畸變。畸變像差只影響影像的幾何形狀,而不影響影像的清晰度。這是畸變與球差、慧差、像散、場(chǎng)曲之間的根本區(qū)別。
我們?cè)谠u(píng)價(jià)鏡頭質(zhì)量時(shí)一般還會(huì)從分辨率、明銳度和景深等幾個(gè)實(shí)用參數(shù)判斷。
2.7、分辨率:
又稱鑒別率、解像力,指鏡頭清晰分辨被攝景物纖維細(xì)節(jié)的能力,制約鏡頭分辨率的原因是光的衍射現(xiàn)象,即衍射光斑(愛里斑)。分辨率的單位是線對(duì)/毫米。
2.8、明銳度(Acutance):
也稱對(duì)比度,是指圖像中*亮和*暗的部分的對(duì)比度。
2.9、景深(DOF):
在景物空間中,位于調(diào)焦物平面前后一定距離內(nèi)的景物,還能夠結(jié)成相對(duì)清晰的影像。上述位于調(diào)焦物平面前后的能結(jié)成相對(duì)清晰影像的景物間之縱深距離,也就是能在實(shí)際像平面上獲得相對(duì)清晰影像的景物空間深度范圍,稱為景深。
大相對(duì)孔徑與光圈系數(shù)
相對(duì)孔徑,是指該鏡頭的入射光孔直徑(用D表示)與焦距(用f表示)之比,即:相對(duì)孔徑=D/ f 。相對(duì)孔徑的倒數(shù)稱為光圈系數(shù)(aperture scale),又稱為f/制光圈系數(shù)或光孔號(hào)碼。一般鏡頭的相對(duì)孔徑是可以調(diào)節(jié)的,其*大相對(duì)孔徑或光圈系數(shù)往往標(biāo)示在鏡頭上,如1:1.2或f/1.2 。如果拍攝現(xiàn)場(chǎng)的光線較暗或曝光時(shí)間很短,則需要盡量選擇*大相對(duì)孔徑較大的鏡頭。
鏡頭各參數(shù)間的相互影響關(guān)系
一個(gè)好的鏡頭,在分辨率、明銳度、景深等方面都有很好的體現(xiàn),對(duì)各種像差的校正也比較好,但同時(shí)其價(jià)格也會(huì)幾倍甚至上百倍的提高。如果我們掌握一些規(guī)律和經(jīng)驗(yàn),就可以使用同檔次的鏡頭達(dá)到更好的效果。
1. 焦距大小的影響情況
- 焦距越小,景深越大;
- 焦距越小,畸變?cè)酱?
- 焦距越小,漸暈現(xiàn)象越嚴(yán)重,使像差邊緣的照度降低;
2. 光圈大小的影響情況光圈越大,圖像亮度越高;
- 光圈越大,景深越小;
- 光圈越大,分辨率越高;
3. 場(chǎng)中央與邊緣
- 一般像場(chǎng)中心較邊緣分辨率高
- 一般像場(chǎng)中心較邊緣光場(chǎng)照度高
4. 光波長度的影響
在相同的攝像機(jī)及鏡頭參數(shù)條件下,照明光源的光波波長越短,得到的圖像的分辨力越高。所以在需要精密尺寸及位置測(cè)量的視覺系統(tǒng)中,盡量采用短波長的單色光作為照明光源,對(duì)提高系統(tǒng)精度有很大的作用。
光學(xué)金相顯微鏡最好的是德國的蔡司顯微鏡,萊卡的也不錯(cuò),這應(yīng)該算高端的顯微鏡;其次是日本的奧林巴斯等,算中上等顯微鏡;國產(chǎn)的質(zhì)量相對(duì)都比較差一些,但價(jià)格比進(jìn)口貨便宜的多,國產(chǎn)的也應(yīng)該是上海的幾個(gè)老廠產(chǎn)品質(zhì)量好一些。另外,除了硬件,顯微鏡應(yīng)用軟件的配置水平以及顯微鏡與電腦之間圖片的傳輸質(zhì)量也非常重要。
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